豬不啃的南瓜

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草魚呼腸孤病毒探索

(2020-03-19 08:28:47) 下一個

新的進展

 

從中國回來後不久,Ahne教授突然找我:“江,你來德國的時間好像是到六月底就到期了啊?”我不禁嚇了一跳:“真的嗎?”Ahne教授認真地說:“是。不算在歌德學院學習德語的時間,馬普好像隻給了你一年的資助,也隻能按照這來給你簽證。可是我們的國際合作才開始不久呀。所以我建議你給武漢水生所和北京的中科院打個報告,要求再延長一年,否則研究工作會有影響的。我也給馬普打個報告,這樣可能更好辦一些。”我猜,大概是馬普外事處跟他說起這事了。我一算:如果不延期,六月底我就得回國。還真的很快了啊!

於是,我趕快給潘老師寫了一封信,談到我們的工作情況,希望能向中科院申請把我在德國的時間再延長一年。同時也按同樣的意思給北京中科院外事局也寫了一封信。還好,外事局的小陳很快就來慕尼黑培訓了。他順便帶來了中科院的通知:為了搞好這次國際合作,同意把我在德國的時間再延長一年。 

從這時起,Ahne教授不再叫我自己摸索,開始給我安排一係列的試驗。

他先安排我做一個草魚的免疫反應試驗。就是拿一批二兩到三兩左右的小草魚,注射一些病毒後,在一定的水溫下喂養。然後每周抽一點點血出來,幾個月後,測定這些血清中的抗病毒抗體的變化情況。從研究上講,是看草魚發病溫度和抗體反應之間的關係,探索致病機理。從技術上講,是對我進行動物試驗技術和病毒學試驗技術方麵的培訓,以掌握相關的操作技術。Ahne教授說:“我們先從十五度水溫開始做,行嗎?”

聽說要從幾兩重的小草魚的血管裏每周抽一次血,我不禁嘀咕起來。我從老鼠尾巴和兔子耳朵裏抽過血,但還不會從魚血管裏抽血,特別是要從這麽小的魚裏每周抽一次,行嗎?Ahne教授看出我的擔心,笑著說:“來,我們一起到養魚房去吧。”我們拿著試驗用品,來到養魚房。我仔細地看看魚,上麵什麽血管也看不見啊!Ahne教授把魚麻醉後,熟練地從草魚的背動脈裏抽出0.2毫升血出來。他仔細地給我講解了抽血的要領和技巧,讓我反複練習。很快,我也能順利地抽出血來了。並且在幾個月的試驗中,能一直從那麽小的魚裏不斷地抽血。

三個月後,試驗結束了。Ahne教授又教我怎樣在細胞板裏做病毒的中和試驗,如何測定抗體的效價……。一直帶著我做完全過程。然後叫我做二十度水溫下的草魚試驗。等這次試驗做完後,Ahne教授笑著說:“就這樣了,草魚在二十五度的反應你將來回武漢再做好了。你先做其它試驗吧。” 

於是,Ahne教授又帶著我,把我從武漢帶回來的草魚血清進行了抗體的純化,用熒光素標記,然後教我如何做免疫熒光並在紫外燈下觀察細胞裏麵的病毒。

一天,Ahne教授突然帶來一個個子很高大的人:“江,給你介紹一下,這是丹麥血清學實驗室的Jorgensen先生!他是做免疫熒光檢測的專家。今天他來給你演示用多層單克隆抗體的熒光免疫技術來檢測病毒的試驗。”後來我才知道,Jorgenson先生是丹麥血清學實驗室的頭,在歐洲也是很有名氣的魚病專家。和Ahne教授的私人關係非常好,所以特地把他請過來。

Jorgenson先生真不愧是專家,病毒僅僅感染細胞幾個小時後,就可以通過他建立的免疫熒光技術檢測到,並且結果非常清晰。從他那裏,我學到了很多東西。

再後來,Ahne教授還有意識地讓我參與檢疫進口草魚的工作。六月,Ahne教授拿來幾條大草魚:“江,這是從匈牙利進口的草魚。你對草魚比較熟,由你來檢查吧!”很幸運,我很快地從這些草魚的內髒中分離到病毒。技術員帶著我,把這個病毒的理化特性,生物學特性,形態學特性和核酸特性一一進行了研究,發現它是一種新病毒。真叫人高興啊!

對Ahne教授而言,一方麵,他很希望我能發表一篇高水平的文章。而另一方麵,這個結果從另外一個角度表明草魚呼腸孤病毒確實是不能產生CPE。因為事實證明我完全有能力分離新的病毒,而不會是有病毒做不出來。而這次新病毒的發現對我而言又是一次大練兵。它給我一個極好的機會,讓我知道該如何研究一個新發現的病毒,並又從中學會了好多實驗技術。

就這樣,有了Ahne教授的精心安排,在完成國際合作研究項目的前提下,也給我進行了係統的技術能力訓練。同時也給了我一些新的研究思路,留給我一些能帶回去繼續研究的題目,為我下一步工作奠定一些基礎。Ahne教授的思路非常清晰:既然這個病毒不能在細胞裏產生CPE,將來的研究工作一定會很困難。因此必須嚐試建立檢測草魚呼腸孤病毒的各種方法,以彌補沒有CPE的缺憾。更為寶貴的是,他為好幾個新的課題開了個頭,為我回國後能不斷有新的研究成果出來做了足夠的準備。用心良苦啊!

Jorgensen和Ahne在實驗室裏

 

經過一段時間的試驗,我觀察到當細胞被草魚呼腸孤病毒汙染後,由於這個病毒不能引起細胞出現CPE,所以細胞表麵上看起來跟正常細胞完全一樣。通常情況下,我們隻是把被汙染的細胞扔掉算了。但一個偶然的機會,我不小心拿它來接種其它病毒,結果發現:即便是接種了能產生CPE的病毒也沒有CPE出現了。我突然想:為什麽感染了草魚呼腸孤病毒的細胞就會幹擾其它病毒再去感染這個細胞?這裏麵是個什麽機理?這引起了我極大的興趣。

我查閱了大量資料,一次又一次地重複各種試驗。各種現象在揭示一個事實:很可能是草魚呼腸孤病毒誘導細胞產生了幹擾素。我把這些試驗的結果給Ahne教授看,他仔細看了半天,認真地對我說:“這是個非常有趣的現象!江,我也不清楚是什麽原因,但我覺得值得研究。”我把這個課題帶回了武漢。這為我回國後進一步深入研究又打開了一扇大門!

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閱讀 ()評論 (8)
評論
1105 回複 悄悄話 看到這篇文章,想到我剛出國時,導師教我做實驗的情景,真是耐心。而且感覺歐美的導師比較注重學生邏輯思維的培養。這點中國的很多老師和教授還有待改善。
1105 回複 悄悄話 看到這篇文章,想到我剛出國時,導師教我做實驗的情景,真是耐心。而且感覺歐美的導師比較注重學生邏輯思維的培養。這點中國的很多老師和教授還有待改善。
菲兒天地 回複 悄悄話 回複 '梅華書香' 的評論 : +1
hotpepper 回複 悄悄話 認真細致嚴謹的學風,才會作出真實的科學發現。
rongrongrong 回複 悄悄話 純粹的人, 高尚的人
梅華書香 回複 悄悄話 厲害的研究工作!
Beautiful_20 回複 悄悄話 寫的真好,看了如身臨其境。我很想知道之後回國的江帆是怎樣重新適應國內的。
欲千北 回複 悄悄話 Ahne 教授和 江先生都是人才。
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