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沏一杯茶，犒勞一下自己---手填稅表做完了
昨天就搞完了聯邦稅，今天把州稅填完，能拿回來總共1800，夠交五月份就要來的房地產稅賬單的三分之一了。。。
LOL，窮人就是這麽計劃著每分錢的用途的。今天帶領導去看open house，真不錯的房子，就是太貴啊，房地產稅就比我現在的多出差不多一倍。問領導：你是願意多幹三年住這個房子呢，還是早三年退休？領導毫不猶豫地選擇後者。。。
不錯不錯，春天來了，今天帶領導去湖邊走了一英裏。懶蟲走不動，我隻好自己多走了幾圈，四英裏吧。馬上可以種菜了，先把體力提升點，翻地有力氣才行。領導問要不要買一卡車top soil，我說等退休後再買，現在沒時間一桶一桶從driveway搬到房子後麵的菜園子呢。。。
（二0二0年二月二十三日）
昨晚回家，給領導交待了家底
我家領導是甩手掌櫃，從來不知道家裏的財政狀況的。她的口頭禪就是：你辦事，我放心。。。
這不，冠狀病毒當前，昨晚整理完稅表，準備今天寄出去的時候，就把她叫過來，在她的記事本上，寫好各個賬戶的大致情況，從life insurance找雇主的那個部門，到退休賬戶的密碼，再到銀行戶頭的雙重保護密碼。。。看完了，人家鼻子一歪：我們賬戶不少，錢倒不多麽。。。
斜了她一眼：不是讓你多幹兩年麽。。。
（二0二0年二月二十六日）
科普--冠狀病毒的核酸檢測
所謂病毒核酸檢測，就是檢測病毒的遺傳物質。冠狀病毒是RNA病毒，就是檢測病人樣品裏有沒有冠狀病毒的特異RNA，原理上和犯罪現場檢測犯人的DNA差不多：就是通過上世紀八十年代末九十年代初發明的PCR技術。
前麵的科普提到DNA/RNA是由四種不同的核苷酸的單體形成的聚合物。有了一條現成的聚合物（X），它對應的另一條（Y）可以通過核苷酸的配對原則（A:T/U或者G:C）來合成。也就是現成的一條作為模板（X），合成另一條（Y）。新合成的一條（Y）在下一輪也可以作為模板，反過來合成最先的X。。。這個循環反複進行，一變二，二變四，四變八。。。條件容許一個X分子，經過30個循環，就可以變成2^30條X，自然可以達到檢測需要的量了。
上麵這個循環就叫Polymerase Chain Reaction(PCR)。它需要一個起始的小片斷，我們叫引物。引物一般是20個左右的核苷酸組成的聚合物，隻要引物找到配對的模板，Polymerase就根據模板的序列，在引物上麵不停地按配對原則加核苷酸，把一個20左右核苷酸長度的引物變得和模板一樣長。所以，是引物的特異性（序列）決定了PCR能擴增那個特異的DNA/RNA模板。假如一個引物的序列是：5’AGGTCGGATGCTCCTTAGGAG，21個核苷酸，按照配對原則，它找到的模板一定很難得。這就是知道了冠狀病毒的RNA序列之後，可以很快設計出冠狀病毒特異引物的原理。一個引物隻能延伸出一條DNA鏈，要兩條鏈都擴增，PCR就用兩個引物，來回擴增。。。所以，保證這個擴增出來的PCR產物一定是冠狀病毒的，有兩個引物的特異性把關，還有PCR產物的大小也是已知的。
PCR的模板隻能用DNA，不能用RNA。所以，對RNA病毒，用PCR方式來檢測，就是先提取樣品裏的RNA，然後進行一步叫“逆轉錄”的反應，也是按核苷酸配對原則，合成DNA後，再PCR檢測DNA。。。
從中國發表冠狀病毒全序列後，核酸檢測就可以實施了，所以核酸檢測是最先實施的。一個有經驗的博士後或技術員，一個分子生物學實驗室就可以做，或者每個州的forensic實驗室也基本能勝任。這個方法的問題出在病毒是RNA上----RNA沒有DNA穩定。我早期在國內做RNA，都很仔細的，主要是降解RNA的RNase無處不在，還特穩定，所以，那時候裝試劑的玻璃瓶都是攝氏400高溫烤四個小時才能用的。現代實驗室都是一次性塑料製品，好了很多。但就是現在我們用商業kit提取RNA後，都是負70度保存的。所以，從病人身上取樣後，保存不好；或取樣量不夠；或病毒RNA被降解等等，就會檢測不到。這個也是早期中國用核酸檢測武漢病毒碰到的問題，很多陽性病人檢測不出來。
PCR檢測的另一個問題是樣品汙染。這個往往發生在試驗操作人員的不小心上。PCR擴增產物是指數級增長的，一般我們作PCR循環，到了35個還檢測不到，我們就定型陰性。如果還往上增加循環次數，往往就會有產物出來了，這樣的結果我們度算不可靠的。一個實驗室天天作同一個PCR產物，往往很容易產生交叉汙染，陰性樣品也會顯示產品。所以，一般實驗室會非常小心，經常會postive/negative control同時進行，確保PCR反映成功（positive control）；同時沒有交叉汙染（negativecontrol）。
RNA不穩定性決定了最好是拿到樣品後馬上處理檢測。美國病人不多，也就沒有緊迫感。武漢湖北可是太緊迫了。而核酸檢測可以同時處理大量樣品，幾個小時就可以出結果。就是有一些不準確也值得啊。。。可以邊做邊調整邊改進。
我們也常做細胞培養micoplasma汙染的。用商業Kit的感覺是需要高汙染才能檢測到。很多時候我憑經驗就知道很可能有汙染了，但PCR的kit經常檢測是沒有汙染。碰到這種情況我們往往人為地讓細胞多長幾天，不換medium，等micoplasma累積多了就能看出來。實驗室無所謂。但針對這個疾病，應該是寧願把陰性搞成陽性，然後再檢測確認，也不能放過陽性的。所以，kit的設計思路上可以有很大的調整餘地。另外，檢測是有和無，是定性的，PCR現在可以定量或傳統方式的半定性。如PCR方式的循環次數多少，就可以改變測試的靈敏度的。我沒用過CDC的測試kit，就不能提具體建議了。
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前幾天還有一個研究生找我請教，如何通過PCR，克隆一個人的基因。他們都知道我有magic，用計算機software設計好了，還找我改進。我看了一下他的思路，問明了他要克隆的人基因在細胞裏表達量高低和基因的大小和結構，指出了他設計的PCR引物偏小，每個引物多加兩三個核苷酸就好；然後讓他在作逆轉錄時別用kit裏提供的通用引物，而是改成他要的基因的specific引物。昨天給我看PCR結果，高興壞了：都浪費了一百多塊錢去買公司的產品，然後自己花了一個禮拜時間，最後發現根本就沒有他要的基因。找公司，公司自己試了，最後承認是沒有，產品下架。。。我這30分鍾就解決了他的問題。。。我開玩笑說，20年前的老知識還是有用的。
（二0二0年二月二十七日）
領導?把我的生日忘了
昨晚都上床了，就聽見電話鈴響：“喝不喝一杯？” 電話那頭是酒鬼。
“啊，這麽晚了。。。聽背景你在開車？” 我問。
“是。剛給學生上完討論課，回家路上呢。”酒友說。
“我家領導忙著給她爹娘打電話呢。”
“哦，我以為她記得你生日呢。。。” 酒友玩笑著。
咱生日多，農曆陽曆農曆推選的陽曆，那個方便就過那個啦。。。所以，領導忘了往往有辦法補救的。這不，今早一起來，領導就嚷嚷：生日今天過。我做饅頭給你吃。。。
晚上叫上老酒友，兩人分享了一瓶瀘州老窖。
兒子大學第三年的financial aid package下來了
寒假的時候就抓住兒子趕緊把申請送進去，誰想FASFA送回來的confirm郵件，說的是2019-2020的數字。我們查了幾遍，明明我們填的表格是2020-2021的。糊塗了，去兒子學校網站查，說申請收到，等FASFA的數據。。。隻好給兒子說：3/31之前還能送一輪申請。萬一FASFA搞錯了，等你春假回來我們再填一次吧。。。
昨晚兒子短信把學校的結果轉給我：兩萬獎學金，一萬出頭的grant，work-study 2200，還有就是loan 5000了。今天趕緊把學校的開銷調出來，七萬出頭。。。算了算，除了loan，我還要掏35000呢。邊喝咖啡邊給領導匯報：到五月份我今年的工作合同結束，要完成的任務很重啊--兒子第三年的錢夠了，可換房頂的錢，五月份要來的房地產稅，還有夏天全家度假的錢還沒著落呢。。。
給兒子短信：貸款是政府補貼的，雖然比上年多了很多，你四年下來的總數也就17000。如果象姐姐一樣大學畢業就找到工作，應該不是問題。work-study的錢爹媽來cover，你掙多少就花多少。老爸老媽還是match你掙的錢，但必須放Roth IRA。。。
窮人家就是這麽數著錢過日子的。。。
（二0二0年二月二十九日）
冠狀病毒當前，國內的“支援”要來了
昨天接到國內北京朋友的微信，她兒子在這裏上學，擔心美國的冠狀病毒擴散，要寄口罩來。怕兒子上課忙，校園人雜，要寄到我家。順便給我們分一百個。。。嗬嗬，我家就沒囤口罩，這下終於有了。。。
這個朋友其實以前不認識的。因兒子要來上學，鄰居是我表妹，就介紹過來了。送兒子來的時候見過一麵，再以後就是孩子有事找找我，過節我們有空就叫過來吃個飯。父母知道了，很客氣，每次孩子回來都不忘帶點禮品給我們。上次兒子的信用卡被盜用後，怕寄丟了麻煩，不敢郵寄，找我們幫忙。正好我有鄰居在國內，回來路過北京，馬上讓他們聯係上，帶過來。寒假兒子回去後，還托兒子帶茶葉給我鄰居，我們也跟著沾光。
朋友也是慢慢處出來的。。。
（二0二0年三月一日）
敢跟管錢的領導頂嘴，膽子不小。
我們也有國內朋友要給這邊上學的孩子寄口罩。正好，讓他們寄給我們國內正急需的親戚，我們給他們孩子寄。