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(看網上爭論河北科大韓春雨的基因編輯方法不能重複有感)
很多年前新到一個實驗室,老板人不錯,但對新來的人多少有些不信任。給我的第一個
project是一篇draft已經寫好,但有幾個試驗需要補充的。兩個作者都已經離開實驗室,
但還在campus裏麵。
其實是一個很簡單的project。一個mutant和wt在DNA binding活性上的比較。在真核細胞裏表達wt和mutant,然後都不用純化,直接上gel-shift。老板把我找過去說:這篇文
章就等一兩個數據,然後就可以送出去了。我已經把數據在一個學術會議上講了,UCSF
那邊有一個實驗室把這個mutant knock-in到老鼠裏,表型和我們的試驗結果非常吻合
。最近那邊來信,問我們什麽時候發表文章,他們想等我們發表了,就送出去。。。
我是第一次作gel shift的試驗,所以小心翼翼。老板也知道我是第一次,除了指定實
驗室的一個老手幫忙外,自己也盯得很緊。第一次結果出來,正好和以前的結論倒過來
。自然重複,連著三次一模一樣的結果。隻好重新表達蛋白,再來。。。到最後連transfection的方法也試了好幾種,結論和原來的就是相反。最後沒有辦法,隻好找原來作試驗的兩個人,挖出了實驗室以前很多不愉快的往事,也大致清楚以前可能出錯的地方:兩個人一個是分子生物學的高手,cloning就是piece of cake;另一個是cell culture高手。兩人各作一部分,是不是中間換手的時候樣品也換了手?誰也說不清,而老板文章壓了一年多,其實他自己有不放心的地方--以前的結果也不是總一致。所以,我成了冤大頭,花了我六個月時間,一無所獲。。。
也不能說完全一無所獲。因為我任勞任怨,試驗結果一致性強,從此老板對我在bench上信任有加,以至於實驗室很多重複性不好的結果,或重要的數據,老板基本讓我作一次才
決定是不是放棄。別人有什麽疑問,老板基本都會refer到我這裏。一幹十幾年,老板
從沒有對我的結果有疑問,常常是:If you can not get it done, we better give
up。。。
記得當年進這個實驗室的時候,門上有一個學生貼的條子:If something comes out
XXXX's(老板名字) lab,it must be good! 經常有實驗室找我們要東西,老板有次
讓我寄材料給另一家實驗室,怕我煩,給我說:有次他去review grant, 開會的時候碰
到一個不認識的新同行,人家告訴他,上次我們的grant就是他審的。他對我們實驗室
送的材料讚不絕口。。。
(二0一六年九月十七日)
reputation建立需要時間和耐心啊。混口飯吃不容易。:(.
一個是in vitro,一個是in vivo。兩中不同的試驗相互可以解釋。完全的重複的結果是不能法兩次的。