我玩mRNA的經曆

來源: 吃與活 2021-09-06 14:37:30 [] [博客] [舊帖] [給我悄悄話] 本文已被閱讀: 次 (2006 bytes)
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mRNA, 中文稱信使核糖核酸,是細胞內合成蛋白質的模板。

mRNA極其容易降解。我們在提取RNA的時候要戴口罩,戴手套,用無RNA酶的器具,操作時不能用手接觸頭發,臉,如果忘了手套上就可能接觸RNA酶。因為RNA酶在自然界到處都是,而且穩定,手上,頭發上,口水裏都有,要做到不汙染RNA酶還是要費些力氣的。保持提純的mRNA要放在低溫,短期負20度,長期保存要負80度。這大概就是美國的兩種mRNA疫苗要低溫保存的原因之一吧。

 

除了從動物組織中提取mRNA, 我們也製造mRNA。我們是先製造一個編碼一個蛋白的DNA,然後在編碼區的下遊加上一段序列,然後加三十多個腺苷酸"尾巴",使mRNA在細胞中保持穩定。我們用反轉錄酶以線狀DNA為模板合成mRNA,然後在mRNA的頭部加上有"帽子",有"帽"有"尾",mRNA才穩定並能在細胞中指導蛋白質的翻譯。我們一般是把合成的mRNA注射到非洲爪蟾卵母細胞中表達所要的蛋白質進行研究。

我靠這這些技術發現了一個重要基因/蛋白,但從來沒有想到用類似的手段來生產抗體。所以得知美國在生產mRNA新冠疫苗時,對他們在幾個星期內就完成設計生產並不意外,因為我知道從mRNA入手比從蛋白或滅活病毒入手要快得多,且安全得多,方便得多。

但是,到底疫苗有效果呢,這誰也不知道,直到臨床試驗出來結果才知道。但這種技術快是肯定的,將來肯定會大有應用前途,比如針對癌症病人特殊突變定製抗癌疫苗等。

盡管采取了一些措施,mRNA注射到體內是不穩定的,生產蛋白的時間很短。至於mRNA能不能整合到染色體上,改變基因什麽的,那都是意想,在專業人員眼裏不值一提。

所有跟帖: 

癌症病人早嚐試過了。估計效果不佳。否則早宣布攻克癌症了 -julie116- 給 julie116 發送悄悄話 julie116 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 14:54:37

給個文獻鏈接唄 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:58:43

你業內人士應該有更好渠道拿數據 -julie116- 給 julie116 發送悄悄話 julie116 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:07:57

我問你的意思就是,知之為知之,不知為不知,不要沒根據地發表看似有根據的言論。 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:29:50

你如果連這個都不知道很疑惑你專業領域到底是什麽 -julie116- 給 julie116 發送悄悄話 julie116 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:42:29

大概是學的是馬克思哲學 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 19:02:31

集權政治學?給吃教授推薦一個需要花錢的論文。其實也有很多不要花錢的。 -julie116- 給 julie116 發送悄悄話 julie116 的博客首頁 (191 bytes) () 09/06/2021 postreply 19:05:59

癌症免疫不是僅僅產生抗體這麽簡單。 -tryyyyyy- 給 tryyyyyy 發送悄悄話 tryyyyyy 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 20:42:16

沒看懂。特指癌症免疫療法,還是癌症疫苗? -pickshell- 給 pickshell 發送悄悄話 (92 bytes) () 09/07/2021 postreply 03:32:56

看來吃兄真的被RNA玩過,對RNA的易降解印象深刻。 -業餘城管- 給 業餘城管 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 15:08:12

我對提純mRNA是有些忌憚的,做砸過。多數時候我玩RNA,少數時候RNA玩我。 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:57:37

如果轉錄成DNA,會不會穩定一些呢? -viewfinder- 給 viewfinder 發送悄悄話 viewfinder 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:39:02

DNA穩定,但需要打到細胞核裏才能轉錄,然後才能合成蛋白。對生產疫苗而言,讓DNA入核技術上做不到 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (209 bytes) () 09/06/2021 postreply 16:54:49

請解釋印度DNA疫苗是怎麽回事 -苦人不哭- 給 苦人不哭 發送悄悄話 苦人不哭 的博客首頁 (128 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:08:17

我不了解印度疫苗,也不想在這上麵花時間。 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:27:27

DNA用電脈衝法導入,效果大增 -xinxin76- 給 xinxin76 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:41:07

多種DNA疫苗早已用在獸用疫苗上。 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:10:43

樓主大概是90年代作的mRNA 工作吧,年代久遠 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:55:51

很好奇如何“用反轉錄酶以線狀DNA為模板合成mRNA” 是嗎?那真是個重大發明 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 17:57:57

諾獎級的工作鴨,埋木了 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:01:00

我隻知道逆轉錄酶是RNA為模板合成DNA -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:02:56

與你共勉 知之為知之,不知為不知,不要沒根據地發表看似有根據的言論 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:04:55

你是對的,是RNA聚合酶,不是反轉錄酶 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 19:06:04

我還在想,你可能把酶的名字寫錯了。 -鍋沿- 給 鍋沿 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 04:49:42

當時在幹木匠活,沒細想,加之好久沒親自做RNA了,腦子也不好用了 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 06:00:58

所以病毒基因是有可能進入染色體的,對嗎?樓主好象認為絕無可能。 -周老大- 給 周老大 發送悄悄話 周老大 的博客首頁 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 01:13:11

應該有這種可能,什麽事情沒有絕對,機率不知道多少。 -鍋沿- 給 鍋沿 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 04:56:39

不懂不要隨便發言為好。 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:40:08

多謝這位專業的帖子。我們知道疫苗是臨時抱佛腳,可是看了半天,也沒有看出來,疫苗到底有沒有用。 -honeydue- 給 honeydue 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:03:29

現在不是測出抗體了嗎? 就是有用吧 -FollowNature- 給 FollowNature 發送悄悄話 FollowNature 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:07:00

這位有些mRNA的工作經驗,但對於mRNA vaccine 可以說10竅通了9竅 -三絲- 給 三絲 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:57:35

臆想 -dudaan- 給 dudaan 發送悄悄話 dudaan 的博客首頁 (0 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:32:49

專等杜編指正 -吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (60 bytes) () 09/06/2021 postreply 18:39:06

謝謝吃與活的介紹,能否悄悄話告訴 -street0120003- 給 street0120003 發送悄悄話 (172 bytes) () 09/07/2021 postreply 03:54:54

-吃與活- 給 吃與活 發送悄悄話 吃與活 的博客首頁 (200 bytes) () 09/07/2021 postreply 06:06:11

唉,良心債欠多了,豈不心虛耶? -米蘭之夜- 給 米蘭之夜 發送悄悄話 米蘭之夜 的博客首頁 (177 bytes) () 09/07/2021 postreply 07:37:03

okay, I understand -street0120003- 給 street0120003 發送悄悄話 (0 bytes) () 09/07/2021 postreply 09:24:15

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