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回答: 黃芪多糖對免疫作用的研究進展 由 禦用文人 於 2018-12-21 00:59:56

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黃芪多糖免疫調節作用研究進展

薑琛璐1,2，湯 承3，騫 宇4，索化夷1,2，李 林1,2,*

                      (1.西南大學食品科學學院，重慶      400715；2.重慶市特色食品工程技術研究中心，重慶      400715；

      3.西南民族大學生命科學與技術學院，四川 成都     610041；4.重慶第二師範學院生物與化學工程係，重慶      400067)

摘 要：黃芪是一味可藥食兩用的傳統中藥材，其中含量最多的活性成分為黃芪多糖。黃芪多糖是一種有多重功效的天然提取物質，具有調節血糖、保護肝腎、調節免疫力和抗氧化防衰老的功效，尤以免疫調節功能最為突出。本文綜合該領域的有關研究成果，就免疫器官、免疫細胞以及有關細胞因子和基因表達等多個方麵對黃芪多糖的免疫調節功能進行綜述。

關鍵詞：黃芪多糖；免疫調節；作用機理

Immunoregulation Effect of Astragalus Polysaccharides

JIANG Chen-lu1,2，TANG Cheng3，QIANG Yu4，SUO Hua-yi1,2，LI Lin1,2,*

       (1. College of Food Science, Southwest University, Chongqing      400715, China；2. Chongqing Special Food Programme and

Technology Research Center, Chongqing              400715, China；3. College of Life Science and Technology, Southwest University for

Nationalities, Chengdu           610041, China；4. Department of Biological and Chemical Engineering, Chongqing University of Education, Chongqing              400067, China)

Abstract：Astragalus is a traditional Chinese herbal that can be used as both medicine and therapy foods, and its most active ingredient content is Astragalus polysaccharides. The natural extract substance, Astragalus polysaccharides, has multiple effects including modulating blood glucose, protecting liver and kidney, adjusting immunity, preventing oxidation and senimu. Among these functions, immunoregulation is the most outstanding one. In this paper, immunoregulation function of Astragalus polysaccharides is studied from the aspects of immune organs, immune cells and the expression of relevant cell factors and genes based on the synthesis of the relevant research results in this field. Key words：Astragalus polysaccharide；immunoregulation；mechanism of action

         中圖分類號： R284.1；R284.2；R285.5       文獻標誌碼：A                               文章編號：1002-6630(2013)11-0327-06

doi:10.7506/spkx1002-6630-201311069

 

黃芪，又名黃耆，屬豆科植物，是我國傳統中藥之一，主要生產於山西、黑龍江、遼寧等省，前蘇聯、朝鮮和蒙古等地也有分布。黃芪味甘性溫，具有益氣補虛、托毒生肌、利水退腫的功效。黃芪的成分包括黃芪多糖(APS)、生物堿、黃酮、葉酸以及多種微量元素，其中黃芪多糖是主要成分，具有廣泛的藥理作用。黃芪不僅是一味常用的補氣藥材，而且還是一種功效顯著的食療藥材，具有藥食兩用的功效。食療中常以黃芪為主配以其他輔材，作為保健防病的食療配方。近年來，黃芪以其出眾的免疫調節功效贏得了越來越多的關注。

1黃芪多糖的組成

收稿日期：2012-03-15

基金項目：“十二五”農村領域國家科技計劃項目(2011BAD34B02-4) 作者簡介：薑琛璐(1988—)，女，碩士研究生，研究方向為食品質量與安全。E-mail：jzhjchl@163.com *通信作者：李林(1957—)，男，主任醫師，學士，研究方向為食品營養與衛生。E-mail：ilinlqc@163.com

黃芪多糖是黃芪有效成分中含量最多的一種，也是其主要的活性成分。從黃芪中分離純化得到的多糖多為白色粉末狀，其分子質量從10～50kD不等，就目前的分析研究結果來看，主要包括葡聚糖、雜多糖、中性多糖和酸性多糖，其中葡聚糖又有水溶性和非水溶性兩種。黃芪多糖的組成較為複雜，並且其組分因品種和植物器官的不同有所差異。曾有報道比較過7種黃芪的多糖含量，其中東俄洛黃芪的多糖含量最多，其次為膜莢黃芪、毛果金黃芪和單蕊黃芪黃，多花黃芪的含量最少。另有研究測定比較了黃芪不同植物器官中的多糖含量，結果顯示多糖含量依次為：根＞莖葉＞種子。對黃芪多糖組成進行分析的報道較多，但原料和方法上的差異使得眾學者的分析結果不盡相同，這也證明了黃芪多糖組成上的複雜性。蔡亞平等[1]利用高效凝膠滲透色譜輔助乙醇分級法按相對分子質量的高低將黃芪多糖分為兩部分，其中高相對分子質量的黃芪多糖結構複雜，難以確定空間化學結構式，而低相對分子質量的部分集中顯示出單相對分子質量的特征，純度高，具有較高的開發和研究價值。 Tomoda等[2]用十六烷基三乙基溴化胺處理，通過柱層析從膜莢黃芪中獲得1種果膠類多糖。Kajimura 等[3]分離得到了黃芪的強酸性多糖和弱酸性多糖。

臨床研究和實驗表明，黃芪多糖能夠改善心、肝、腎髒的功能，調節血糖和血壓，增強機體免疫力，還具有抗氧化、抗病毒、防衰老的作用。其中黃芪多糖的主要生物活性是調節機體免疫力，並且黃芪多糖的其他生物活性很大程度上都基於其對機體免疫係統的調節作用。

2黃芪多糖的免疫功效

黃芪多糖對免疫功能的調節作用不僅在於能夠增強免疫器官和細胞的功能，還能刺激細胞因子的釋放，影響神經-內分泌-免疫係統網絡，促進相關基因的合成和表達。

2.1 對免疫器官的影響

免疫器官分為中樞免疫器官和外周免疫器官，其中前者包括胸腺、骨髓(禽類為法氏囊)，後者主要指脾髒、淋巴結等。研究表明黃芪多糖能夠作用於多種免疫器官，增加器官質量，提高髒器指數，還能夠促進部分髒器的發育。單俊傑等[4]研究發現補充黃芪多糖能提高小鼠胸腺的質量；胡曉燕等[5]在對運動性免疫抑製調理研究中發現黃芪多糖能拮抗遞增負荷訓練大鼠的胸腺萎縮；安鬆蘭等[6]用不同劑量的黃芪多糖刺激環磷酰胺處理的小鼠，結果表明脾髒及胸腺指數均有增加；此外黃芪多糖還能促進雞法氏囊和脾髒的發育。

2.2 對免疫細胞的影響

2.2.1 對特異性免疫細胞的影響

黃芪多糖對特異性免疫細胞的影響主要體現在能增加B淋巴細胞和T淋巴細胞的增殖分化、提高漿細胞的分泌、增加血清抗體濃度、調節T淋巴細胞亞群的平衡等方麵。有學者通過電鏡觀察發現，黃芪多糖可使小鼠漿細胞內粗麵內質網擴張，抗體蛋白質增多。邱妍等[7]以雛雞為研究對象，發現黃芪多糖組雛雞的十二指腸和盲腸扁桃體中陽性漿細胞數量增多，並且HI抗體效價、CD3+和SIgA 的含量也明顯高於對照組。此外，劉明研[8]、魏鳳仙[9]等分別以犬和豬作為研究對象，均發現經過黃芪多糖處理，動物機體內的免疫球蛋白數量增加。Shao Baomei等[10]研究發現脂多糖能夠抑製黃芪多糖與B細胞的結合，猜測兩者具有部分相似的結合位點，但認為黃芪多糖隻能激活B 細胞的增殖和細胞因子的釋放，而對T細胞沒有效果。宋淑珍等[11]探討了黃芪多糖對健康成人的免疫力調節作用，實驗結果顯示服用黃芪多糖後體內T輔助細胞和T抑製細胞(CD3、CD4/CD3)比值增高，T抑製細胞

(CD3+、CD8+)水平下降。黃芪多糖也能夠增加雛雞體內 CD3+淋巴細胞數，提高CD4+/CD8+比值。此外，黃芪多糖還能促進細胞表麵黏附分子的表達，從而使得淋巴細胞與內皮細胞黏附，增進淋巴細胞的再循環[12]。

2.2.2 對非特異性免疫細胞的影響

NK細胞和巨噬細胞是機體非特異性免疫中的重要細胞。NK細胞通過分泌幹擾素、IL-2等來調節免疫功能，研究發現黃芪多糖能夠刺激NK細胞的增殖，同時還能增強其殺傷力。翁玲等[13]對環磷酰胺化療後的小鼠注射黃芪多糖，結果表明黃芪多糖能夠增加NK細胞的活性。而黃芪多糖對巨噬細胞的激活作用主要表現在增加細胞數量，增強吞噬功能，促進細胞分化以及調節腹膜巨噬細胞分泌IL-2等方麵，從而提高巨噬細胞殺滅和清除抗原的能力[14-15]。

紅細胞和樹突細胞(DC)具有抗原呈遞的作用，能夠對抗原進行識別和加工。黃芪多糖可增強這兩種細胞的功能，從而提高機體的非特異性免疫功能。王旭貞等[16] 以黃芪多糖作為免疫佐劑，接種於雛雞體內，結果顯示雛雞C3b受體花環率E-C3bRR和促進因子活性顯著提高，而免疫複合物花環率E-ICRR和抑製因子活性降低，顯著提高雛雞的紅細胞免疫功能。Jiang Junbing [17]等和Li Hongquan [18]等的研究也發現黃芪多糖對IBDV感染雛雞的紅細胞有類似作用。陳朝俊等[19]通過對人單核細胞源樹突細胞的研究發現，黃芪多糖可以促進DCs成熟，並增強其活性。Shao Peng等[20]的研究顯示黃芪多糖還可增長

DCs的樹突結構。

除此之外，黃芪多糖還能促進有關造血幹細胞的增殖和成熟，刺激相關因子表達，從而促使血細胞再生，為免疫細胞的發育分化提供前期條件[21]。另有資料顯示黃芪多糖還可能延緩記憶淋巴細胞的凋亡，延長其存活時間[22]。

2.3 細胞因子和胞內信使物質的影響

黃芪多糖對細胞因子、信使物質以及多種酶都有調節作用，但是對不同疾病機製的調節的作用有所不同。陳蔚等[23]通過建立非肥胖糖尿病(NOD)小鼠模型研究了黃芪多糖對NOD小鼠T細胞亞群的免疫調節機製，黃芪多糖組胰島IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、和INF-γ水平顯著下降，證明黃芪多糖能夠糾正細胞因子的免疫失衡狀態。Yin Xiaolin等[24]則通過細胞培養和活體實驗顯示黃芪多糖能誘導膀胱上皮細胞中TLR4的表達，從而非特異性免疫應答。Zhao Luhang等[25]研究發現黃芪多糖可誘導巨噬細胞產生TNF-α、GM-CSF並提高NO生成量。徐荔等[26]也發現黃芪多糖能抑製LPS誘導的巨噬細胞產生 TNF-α、IL-1β和NO，提高機體抗炎症反應。Ko等[27]發現黃芪多糖可通過調節鼠體內的Th1/Th2的平衡，對腸黏膜起到一定保護作用。

樊英等[28]對刺參注射黃芪多糖溶液發現刺參體腔內因子活性和含量均得到提高，包括溶菌酶、超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶等。胡庭俊等[29]則對小鼠進行了研究，結果顯示黃芪多糖能促進腹腔巨噬細胞NO的生成，明顯提升細胞蛋白激酶C的活性，並使淋巴細胞內Ca2+水平升高。另有研究顯示將黃芪多糖添加至羅非魚飼料中進行喂養，可提高羅非魚血漿中酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、過氧化氫酶和溶菌酶的活力[30]。同時，羅非魚腸道中誘導型一氧化氮合成酶和生長抑素陽性細胞數量較對照組也有減少，其中生長抑素是神經-內分泌-免疫網絡的重要介質，對胃腸道有廣泛的抑製作用。

2.4 對相關基因表達的影響

黃芪多糖的免疫調節作用還體現在能夠促進細胞中 RNA、DNA和蛋白質的合成，並調節有關基因物質的表達。Li Jiefeng等[31]在探究黃芪多糖對接種口蹄疫疫苗豬的作用時發現，黃芪多糖不僅能顯著提高特異性抗體的滴定度，還能促進INF-γ和IL-6mRNA的表達。Yuan Chuntao等[32]也通過實驗發現黃芪多糖能夠調控鯉魚頭腎中有關免疫基因的表達。朱培成等[33]研究了斑禿患者服用黃芪多糖後的基因表達情況，結果提示黃芪多糖對轉錄因子T-bet及Th1型細胞因子基因的表達有抑製作用，能促進Th2型細胞因子基因的表達，使Th1型反應逆轉漂移向Th2型。另有資料表明黃芪多糖能抑製iNOSmRNA 的表達，從而降低巨噬細胞NO的生成量[34-35]。

2.5 其他作用

除以上主要機製外，黃芪多糖還能提高機體的補體水平，增強抗氧化和抗病能力。肖嘯等[36]對犬注射適量的黃芪多糖溶液，機體C3、C4補體水平顯著提高，並存在一定的劑量效應關係。李巨銀等[37]研究發現黃芪多糖對雛雞的傳染性法氏囊病有一定的預防效果。黃芪多糖還具有一定的抗氧化和腫瘤抑製作用，能夠增加血清和肝、腎中抗氧化酶的活性，降低脂質過氧化水平，從而增進免疫預防和監視效果[38-40]。除此之外，Cho等[41]發現黃芪多糖還能恢複高齡小鼠體內的淋巴細胞增生反應，從而表現出免疫恢複作用。

3黃芪多糖的結構與改性

黃芪多糖本身是一種混合物，其結構較為複雜，眾多學者對其結構的研究結果差異較大。Li Shigang等[42]通過傅裏葉變換紅外光譜、核磁共振以及氣質聯用等方法對黃芪多糖的結構進行了分析，結果顯示黃芪多糖是以α-(1-4)、 α-(1-6)糖苷鍵連接而成的一種葡聚糖，Li Rui等[43]通過氣相色譜和紅外輻射分析也得到了類似的結構。李宏全等[44]通過微波輔助提取技術從內蒙黃芪中分離獲得了1種雜聚多糖，紅外光譜和核磁共振分析該多糖以葡萄糖為主，經 α-型糖苷鍵連接而成，HPLC分析單糖組成為鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。Jiang Junbing等[17]對提取的黃芪多糖進行氣相色譜分析，結果顯示其單糖組成包括甘露糖、半乳糖、果糖、木糖和海藻糖，紅外光譜分析其主要結構由α-和β-型糖苷鍵連接而成Yan Hui等[45]通過氣相色譜和傅裏葉變換紅外光譜分析的黃芪多糖樣本以甘露糖為主要組成成分，並伴有葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。盡管不同學者對黃芪多糖的結構分析有所差異，但綜合看來其組成單位主要包括葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、果糖、木糖、葡糖醛酸和半乳糖醛酸等，而這些單體主要通過α-(1-4)、α-(1-6)等α-型糖苷鍵進行連接，另外還有α-(1-2)、α-(1-3)、α-(1-5)糖苷鍵，β-型糖苷鍵較少。

隨著黃芪多糖結構研究的深入和多糖改性熱潮的高漲，對黃芪多糖也展開了改性研究。有關多糖的改性方法有硫酸化、羧甲基化、乙酰基化等，改性方法的不同對多糖活性的影響也不同，其中硫酸化修飾能有效提高多糖的免疫活性[46-49]。目前黃芪多糖的改性主要是對其進行硫酸化或與金屬離子絡合。黃小燕等[50]通過正交試驗優化了黃芪多糖的硫酸化修飾條件，得出氯磺酸與吡啶體積比為1:6，95℃下反應1h的最佳條件，並認為硫酸化修飾黃芪多糖的抗病毒活性與硫酸基取代度相關。Huang Xiaoyan等[51-52]將硫酸化修飾與未修飾的黃芪多糖進行比較，結果顯示硫酸化黃芪多糖在提高抗體滴定度和促進淋巴細胞增殖方麵的效果更好。施誌玉等[53]將3種不同的硫酸化黃芪多糖注射給14日齡的雛雞，並設未改性的對照組，結果顯示硫酸化的黃芪多糖在促進T淋巴細胞增殖和提高血清抗體效價等方麵明顯優於為改性組，並呈現出一定的劑量效應關係。其中尤以sAPS60的取代度最高

(為1.545)，活性最強。另外，龔曉鍾等[54]還利用硒化劑 SeOCl2對黃芪多糖進行了硒化改性，以樣品量(g)和硒化劑(mL)等比混合，反應48h為最優條件，改性黃芪多糖的含硒量為16820μg/g，收率達85.8%。硒化黃芪多糖將有毒無機硒轉變為無毒有機硒，形成五元環的亞硒酸酯的結構。硒化黃芪多糖同時兼備硒和黃芪多糖的生理和藥理作用，其生物活性高於未改性的黃芪多糖，更有利於機體的吸收和利用，小鼠藥效實驗也證明了硒化黃芪多糖有較好的安全性和免疫作用[55]。此外，黃芪多糖與鉻的絡合還可增強其降糖效果[56]。

4黃芪多糖免疫調節效果的影響因素

黃芪多糖具有較好的免疫調節作用，在實際操作中發現許多因素都可能對其作用效果產生影響，主要表現在攝入途徑和量效關係方麵。

黃芪多糖的攝入途徑會影響其作用效果，唐雪明等[57] 發現對雞外周血中NK細胞活性的提高效果方麵，注射攝入的黃芪多糖要優於口服攝入。王學斌等[58]則比較了黃芪多糖粉劑和注射劑的差別，結果表明就提高雛雞的脾指數、法氏囊指數以及EPRC形成率而言，粉劑的效果要優於注射劑。而有報道顯示黃芪多糖對腹腔巨噬細胞的活化作用僅限於腹腔注射途徑。另外，劑量大小也會影響黃芪多糖的效果。Zhang Nuowei等[59]發現低劑量的黃芪多糖對小鼠的CD40、CD86有輕微抑製作用，而高劑量時則表現促進作用。多數研究也顯示黃芪多糖的作用效果在適當範圍內呈現一定的劑量反應關係。當黃芪多糖與其他中藥成分共同使用時，表現協同作用，從而優化黃芪多糖的免疫調節效果。張善玉等[60]就研究了黃芪多糖與人參總皂苷聯用的免疫調節作用，結果表明共同作用組的部分指標明顯高於黃芪多糖單用組。Yan Fei等[61]的研究也顯示黃芪多糖與LFS(五味子)有協同作用。Fan Yunpeng等[62]則用脂質體包裹黃芪多糖，製成囊狀，結果顯示黃芪多糖的作用效果有所提升。此外， Kiyohara 等[63]從黃芪中分離出9種有效多糖成分，發現不同側鏈對集合淋巴結的免疫調節貢獻不同，同時半乳糖基側鏈的降解還會降低免疫調節效果。張恩戶等[64]將分子質量在21～41kD的黃芪多糖與其水解產物(分子質量在 10～21kD)進行比較，結果顯示水解後的低分子質量的多糖產物在提高免疫低下小鼠淋巴細胞增殖和血清溶血素方麵效果更加顯著，從而推測降解後的黃芪寡糖的活性要強於大分子的黃芪多糖。由此可見，結構上的差異也會造成免疫效果的不同。

5應用現狀

黃芪多糖對分特異性和特異性免疫都具有調節作用，並且具有價格低廉、資源豐富、毒副作用小的優點，隨著對其作用效果的研究深入而被應用於實際生產當中。

黃芪多糖本身具有調節機體免疫力的作用，與疫苗共同使用不僅可以保護疫苗，還能增強疫苗的作用效果。有研究將黃芪多糖添加至對哮喘小鼠的特異性免疫治療 (SIT)，發現黃芪多糖可增強SIT的效果[65]。張競之等[66]研究發現黃芪多糖能夠抑製TLR-NF-κB的表達，減輕該途徑介導的炎症反應和免疫紊亂，進而保護高血壓患者血清損傷的血管內皮細胞。昭日格圖等[67]觀察了黃芪多糖對血脂異常誌願者的降血脂作用，結果不僅證明了黃芪多糖對人體無健康影響，還能輔助降低血清總膽固醇的含量。李豪俠[68]對33例晚期胰腺癌患者注射黃芪多糖進行治療，多個指標顯示黃芪多糖有利於改善病患的生活質量，提高了機體的免疫功能。陳增邊[69]發現注射黃芪多糖能改善鼻咽癌放射治療患者的免疫功能。由此可見，黃芪多糖已成為一種有效的免疫佐劑和腫瘤治療的輔助手段而廣泛應用於臨床治療，充分發揮其安全性高、副作用小、適用麵廣的特點。

除以上用途，黃芪多糖還作為飼料添加劑和獸藥成分應用於養殖業中，不僅能促進畜禽的生長、提高畜禽產品品質，還能有效防止畜禽疾病、降低發病率。同時黃芪多糖還具有抗菌、抑菌的作用，對金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、大腸埃希氏菌以及炭疽杆菌、鏈球菌等均抑製效果[70]。黃芪多糖以其安全性高的特點能較好地滿足人們對獸藥低殘留的需求，從原料安全出發，保證食品質量。

6前景展望

隨著生活和科技水平的不斷提高，綠色環保成為人們關注的焦點，這也使得對中藥的研究越來越深入。無論是低毒、低殘留綠色生態的發展，還是當今醫學從治療型向預防型進行的轉變，天然活性物質的開發和利用都將使得生態經濟、疾病預防邁入一個新的階段。而黃芪多糖正是一種資源豐富、價格低廉的天然產品。安全高效、毒副作用小的優點無疑證明了黃芪多糖具有極大的開發潛力和良好的應用前景。目前，對黃芪多糖的研究多局限於其本身的結構，主要作為免疫佐劑和飼料添加劑被使用，應用範圍較窄，缺乏深度開發和研究。未來可拓寬對其改性方麵的研究，采用不同改性方法對其結構進行修飾，並研究各種改性產物對其免疫效果的影響，探討不同改性產物和疾病機理下的作用機製，擴大並優化其免疫調節功能，將實驗結果推廣至生產實踐。同時，還可拓寬黃芪多糖在保健食品方麵的應用，將其作為一種單獨的生物活性物質加工成具有免疫調節效果的衝劑、片劑或膠囊等形式，或與其他物質複配研發保健產品，以此改變單純傳統的食材攝入方式，提高黃芪多糖的有效攝入量和作用效果。除此之外，還可以結合有關臨床研究，加強黃芪多糖作為人體免疫佐劑的潛力開發，推廣其臨床應用，將黃芪多糖的應用領域由現在的獸藥畜牧業逐漸拓寬至保健食品和醫藥治療等方麵。

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