Original YGNF 有機合成 2023-10-25 21:00
正相矽膠柱層析，上樣分為濕法上樣和幹法上樣。濕法上樣雖然方便，但是如果樣品不是液體，要預先用小極性溶劑溶解，可能會影響分離效果，很多樣品則無法溶解，此方法應用範圍受到很大限製。幹法上樣，即矽膠吸附法，則適用於大部分情況（矽膠是酸性的，對酸敏感的化合物不適合此方法）。因此矽膠拌樣是實驗室中必備的操作技能，但是你真的會拌樣嗎？拌樣為什麽拌幹很重要？拌樣如果沒有完全旋幹大極性溶劑，則會嚴重影響柱層析的分離度！殘留的大極性溶劑相當於提高了最開始洗脫溶劑的極性。極端情況下，對於一些小極性的產物，如果殘留較多的大極性溶劑，樣品會直接會衝下來，白忙一場。另外即使殘留少量的溶劑也會明顯影響色帶的平整度，如果有Rf值相近的雜質，則無法完全分開。下麵小編介紹一下拌樣的標準操作：首先，在圓底燒瓶中將混合物溶解在二氯甲烷中，二氯甲烷是最優選擇，如果單純二氯甲烷無法溶解可以考慮加入少量乙酸乙酯或甲醇促溶。加入矽膠（矽膠的質量大約是化合物質量的兩倍，矽膠密度0.5左右，可以粗略量體積來確定量）。在旋轉蒸發儀上濃縮該溶液。（注意：矽膠是非常細的粉末，很容易被吸入旋轉蒸發儀中。用脫脂棉塞住防濺球進行拌樣，但不要太緊）。當矽膠成均勻的流沙樣，且沒有氣體冒出時，說明固體已經幹燥，從旋轉蒸發儀上卸下燒瓶，再用真空泵將溶劑完全抽盡（注意：脫脂棉塞住抽氣頭，防止矽膠吸入油泵）。當矽膠再沒有氣泡產生時，從真空係統中取下燒瓶，用幹淨的刮刀從壁上刮下固體。 進行上樣。如果拌樣後，發現有結塊，說明矽膠的量可能不夠，可以重新加入溶劑溶解後，再補加矽膠重新拌樣。如果矽膠加入的量是足夠的（兩倍質量），但是拌樣矽膠還是有結塊，說明樣品中有高沸點溶劑沒有除去，如1,4-二氧六環，單純的1,4-二氧六環可以用水泵旋掉，但是樣品中殘留的1,4-二氧六環被矽膠吸附，則單純用水泵很難完全旋幹。這種情況可以考慮把旋轉蒸發儀的水泵換成油泵進行拌樣。
