做出來一個物質,HPLC顯示一個峰,但是在TLC板上卻顯示兩個點,是腫麽回事?
最直接地,你首先需要做一個核磁看一下(氫譜,氟譜或碳譜),如果核磁顯示是很純的一個物質,那麽可能存在以下幾種可能性:
1、
化合物本身帶有胺基,一般情況下一些帶胺基的化合物經常在TLC上會爬出兩個點。
2、
化合物在矽膠板上不穩定,因為矽膠是弱酸性的,樣品在爬板過程中壞掉,或者樣品在爬板過程中被氧化,造成TLC板上顯示兩個點或多個點,建議用中性氧化鋁板來代替矽膠板重新爬板,如化合物比較敏感,應同時注意隔絕空氣和水氣。
3、
產品部分成鹽,可能會在矽膠板上出現兩個或兩個以上的點。
4、
化合物本身存在互變異構,如帶有乙酰丙酮的結構,可能會在TLC板上有烯醇式的東西出現,顯示兩個點。
5、
非對應異構體有時候TLC是可以分開的。
6、
一些物質的Z、E構型的極性不同,TLC顯示兩個點,如在一些肟化的反應中。
7、
一些生物堿類在TLC上經常顯示為兩個點。
8、
點板樣品的濃度,有時候點板濃度太濃,TLC會顯示兩個點,而在濃度稀的時候則為一個點。
如果核磁顯示不純,則可以印證化合物樣品本身就不純,可以爬大板分離出各個組分以鑒定其結構,然後再分析雜質出現的原因,同時積極和分析人員溝通,更換色譜柱或流動相、吸收波長、梯度等其它分析條件,確保兩種物質可以有效地被分離。如果先前為反相柱的結果,可以考慮用正相柱分析一下。
如果沒有條件打核磁,可以看一下HPLC或LCMS的峰型,如果峰型很窄很尖,則一般情況下分離度比較好,如果峰型為寬圓的峰,則說明有可能有東西包在主峰裏麵,一般這個分離條件是有問題的。
以上小編談了自己的一些想法,遇到具體的案例,還需要具體問題具體分析,匯總各種信息作出綜合研判。歡迎大家探討、補充、指正。