微量樣品柱層析

有機合成中經常會遇到微量樣品的分離，通常情況下，對於少於100毫克的樣品的純化，有以下幾種純化方法：1、直接高效液相製備色譜(Prep-HPLC)純化；2、製備薄層色譜(Prep-TLC, 俗稱爬大板)；3、微量樣品重結晶；4、微量柱層析法。微量柱層析法，相對於上述方法，更加經濟綠色，而且操作方便，通常十幾分鍾就可以完成，相對於爬大板，不用浸泡矽膠，避免產生一些不必要的雜質。對於一些極性不是很大的產物，可以優先考慮此方法。但是沒有柱子怎麽柱層析呢？實驗室中唾手可得的玻璃滴管就可以用於微量柱層析。

第一步：裝柱

塞入少量棉花，用木棒壓實，不要太緊，隻需要防止矽膠漏下就可以。

裝入矽膠，在桌麵上輕輕地敲一敲，將矽膠壓實，上方留4-5cm，用於上樣和加洗脫劑。

 

和過大柱子類似，先用滴管在滴管柱上方加入小極性溶劑，通過不斷加入溶劑，可以靠重力讓柱子潤濕。如果嫌慢，直接用乳膠頭加壓，但是一定要注意，擠壓後千萬不要鬆開，壓完後拔下乳膠頭再鬆開，否則會把矽膠和溶劑吸起來。當溶劑開始滴下時，完成潤柱，但是一定要保持上方的溶劑不要幹。

 

第三步：上樣

與平時過大柱子類似，也分為濕法上樣和幹法上樣，具體選哪種要根據樣品的性質決定，如果產物極性較大而且溶解度好，可以考慮濕法上樣。但是小編建議用幹法，因為本來柱子就短，濕法上樣會影響部分柱效，會導致分離效果不佳。

第四步：洗脫

根據TLC, 選擇合適的溶劑配比, 不斷加入溶劑洗脫，利用乳膠頭加壓，溶劑液麵保持在矽膠上方，不要壓幹。還是要注意擠壓乳膠頭後不要鬆開，拔下再鬆開。由於柱子很小可以方便的根據分離難度，調節溶劑梯度。

及時更換容器，接收不同洗脫液，由於量很少小編建議用試管接收比較好，通過TLC或者LCMS確定所需產物。

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