今天的試驗，plate孔內的1 N NaOH 100ul憑空消失，匪夷所思，百思不得其解

實驗步驟簡單如下：

SOFIA with Rolling circle DNA amplification (T4 ligase normal standard)

1. Coat plate with : Anti-GFAP antibody.

2. block

3. serum（14samples）

4. Biotin-anti GFAP antibody.

5. Streptavidin

6. Primer: biotin-prostate-primer

7. T4 ligase

PEG4000

    phos-template

8.ф29 DNA polymerase buffer 

       BSA

      each DATP,DGTP,DCTP

       DTTP+DUTP-Texas Red 

      ф29 DNA polymerase

      PBS 

9. 1 N NaOH 

10. Laser test

今天的試驗，神出鬼沒，試驗plate孔內的1 N NaOH 100ul憑空消失，匪夷所思，百思不得其解。

Plate 1

Plate 1, C 和E的3，4,5,6,7,8,9，是樣品1，2,3,4,5,6,7，C和E的1,2,10,11,12是PBS。這裏最重要的條件是：C和E完全一樣。

plate 2

Plate 2, C 和E的3，4,5,6,7,8,9，是樣品8，9,10,11,12,13,14，C和E的1,2,10,11,12是PBS。這裏最重要的條件是：C和E完全一樣。

實驗進行到第9步驟，就是加了1 N NaOH （100ul ），零下20度過夜。第二天要進行Laser test的時候，發現，

1. Plate 1, C的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH，不見了，而與之對應的Plate 1, E的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH還在，而C和E的1,2,10,11,12的內的100ul 1 N NaOH還在。

2. Plate 2, C的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH，不見了，而與之對應的Plate 2, E的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH還在，而C和E的1,2,10,11,12的內的100ul 1 N NaOH還在。

這消失的100ul 1 N NaOH，去了哪裏？

假如是serum的區別，就是C和E的1,2,10,11,12的內的100ul 1 N NaOH還在（就是PBS還在，而serum不在了），那麽，為什麽, E的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH還在？而C的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH消失了呢？

這裏一個重要的信息是，剩餘的 1 N NaOH幾乎是100ul，而消失的1 N NaOH的plate孔，很幹淨，幾乎看不見任何液體。

這憑空消失的條件是什麽？關鍵是與之完全對應的E的3，4,5,6,7,8,9內的100ul 1 N NaOH還在.