意大利經濟上的發達和政治上的分裂,激起法國君主的貪欲,並為入侵提供了可乘之機。1491年9月,法王查理八世率軍越過阿爾卑斯山,侵入意大利。由北往南橫掃意大利全境,次年2月占領那不勒斯王國,1495年5月查理加冕為那不勒斯國王。查理的勝利激起意大利各國的反對,於是阿拉岡國王斐迪南以西西裏國王的名義聯合教皇亞曆山大六世、德國皇帝馬克西米連一世以及威尼斯等,結成威尼斯同盟共同反對法國。1496年,那不勒斯在阿拉岡的援助下恢複了國家,法國的侵略果實化為烏有。路易十二繼位後,采取外交手段拆散了威尼斯同盟。1499年,路易侵占了米蘭。1500年,法國與西班牙共同瓜分了那不勒斯。1504年法國被西班牙趕出那不勒斯,又返回米蘭,形成兩個入侵國家南北對峙的局麵。法蘭西斯一世上台後,於1515年馬林雅諾戰役中打敗瑞士,成為米蘭公爵,從而切斷德國和西班牙的聯係。法蘭西斯一世和查理五世在意大利進行了四次戰爭。1525年,雙方在巴威亞爆發激戰,結果法王被俘,法王以放棄米蘭為代價才得以贖身。查理的勝利,使教皇克立門七世加入法國的反皇帝同盟。1527年5月,查理派兵攻入羅馬。1529年締結和約規定,法國放棄對意大利的主權要求。1535年為處理米蘭公爵繼承權問題,雙方又啟戰端,結果法國失敗。法蘭西斯一世之子亨利二世即位後,竭力支持德國諸侯反對皇帝,並取得凡爾登、麥茨、士爾三個主教區。1559年意大利戰爭結束,雙方締結和約。