公元前334年亞曆山大東侵,長驅直入地占領波斯帝國所屬的西部廣大地區和埃及。他在埃及補充修整之後,繼續東進,經巴勒斯坦、敘利亞侵入美索不達米亞,開始了奪取波斯帝國東部地區的戰爭。公元前331年10月,在底格裏斯河左岸尼尼微城附近的高加米拉原野,雙方進行了一場最大的戰鬥,亞曆山大投入7000騎兵和4萬步兵,而大流士三世步兵號稱百萬。戰鬥開始後,波斯軍首先發動進攻,企圖用裝備著鋒利鐮刀的200乘戰車首先衝跨亞曆山大的方陣。但波斯戰車衝來時,馬其頓軍讓開一條路而退到兩側,預先埋伏好的馬其頓弓箭手則給戰車以重創。由於主力進攻撲空,波斯軍隊形頓時混亂。隨後亞曆山大率領右翼的精銳騎兵向波斯軍隊的左翼猛衝過去,並轉而衝向大流士三世,方陣步兵又給騎兵以有力的支援。在馬其頓騎兵和步兵的強大攻勢麵前,大流士三世甚為恐慌,於是又重演了伊蘇斯戰役中臨陣逃脫的醜劇。結果,波斯軍全線潰敗,陣亡者達10萬餘。高加米戰役是一次決定波斯帝國命運的戰役。在這次戰役中,亞曆山大摧毀了波斯帝國的軍事力量,大流士三世再沒有可能重新聚集軍隊再戰。此後,亞曆山大率軍東進,滅亡了波斯帝國。